1.初識生物安全櫃
生物安全櫃可提供樣品和工作人員的雙重保護。過濾後的潔淨氣流從安全櫃頂部吹下,通過工作區域,在到工作人員的呼吸區域前被俘獲。氣流在放空前將被過濾,一般情況下過濾後的空氣將被排回實驗室或者通過排氣管道排出室外各生物安全等級適用的生物安全櫃。
實驗室生物安全等級 | 應用的生物安全等級 | 所能提供的保護 | ||
人員 | 試驗品 | 環境 | ||
1-3 |
I級 |
可 |
否 |
可 |
1-3 |
II級A2 B2 |
可 |
可 |
可 |
4 |
III級 |
可 |
可 |
可 |
生物安全櫃可分為一級、二級和三級三大類以滿足不同的生物研究和防疫要求。所有類型的生物安全櫃都在排氣和進氣口使用HEPA /ULPA過濾器。一級生物安全櫃可保護工作人員和環境而不保護樣品。
二級生物安全櫃是目前應用最為廣泛的櫃型。按照NSF49 的中的規定,二級生物安全櫃依照入口氣流風速、排氣方式和循環方式可分為4 個級別:A1 型,A2 型(原B3 型),B1 型和B2 型。所有的二級生物安全櫃都可提供工作人員、環境和產品的保護。
由於效果類似及比不廣泛使用,A1 型和B1 型已不流行,而A2型及B2 型已可以滿足需求,所以比較流行。
A2 型安全櫃前窗 70%氣體通過 HEPA 過濾器再循環至工作區,30%的氣體通過排氣口過濾排除。
A2 型可使用微量非揮發性有毒化學品及放射性物質及微量揮發性有毒化學品及放射性物質微量。
2.生物安全櫃的國際認證標準
目前世界上最通用的生物安全櫃國際認證是美國的NSF/ANSI 49 和歐盟的EN12469,這兩種標準對安全櫃性能分級、安全性能檢測都有詳細的說明和要求。安全櫃標準對規範安全櫃市場,保護研究人員起到重要的作用。
- 美國NSF 標準:"Class II (laminar flow) Biosafety Cabinetry" NSF/ANSI 49, Ann. Arbor,MI.US.,2002.
- 歐盟EN 標準:"Biotechnology-Performance criteria for microbiological safety cabinets" .EN12469,CEN/CENELEC, BSI,2000.
3.生物安全等級簡介生物安全等級簡介
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生物安全等級 P1
進行試驗研究用的物質都是已知的,所有特性都已清楚並且已證明不會導致疾病的多種微生物物質。研究通過日常的程序在公開的實驗檯面上進行。不需要有特殊需求的安全保護措施。操作人員只需經過基本的實驗室實驗程序培訓並且通常由科研人員指導,在這樣的環境下並不需要生物安全櫃的存在。
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生物安全等級 P2
進行試驗研究用的物質是一些已知的中等程度危險性的並且與人類某些常見疾病相關的物質。操作者必須經過進行相關研究的操作培訓並且由專業科研人員指導。對於易於污染的物質或者可能產生污染的情況進行預先的處理準備。一些可能涉及或者產生有害生物物質的操作過程都應該在生物安全櫃內進行,在這些條件下最好使用二級的生物安全櫃。
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生物安全等級 P3
進行試驗研究的物質一般都是本土或者外來的有通過呼吸傳染使人們致病或者有生命危險的可能的物質。我們需要保護一切在周圍環境中等操作者免於暴露於這些有潛在危險的物質中。通常使用二級或者三級的生物安全櫃是必需的。
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生物安全等級 P4
進行試驗研究的物質是一些非常高危險性並且可以致命的有毒物質,可以通過空氣傳播並且現今並沒有有效的疫苗或者治療方法來處理。操作者必須經過熟練的關於進行這種非常高危險性物質研究的培訓,並且應該很熟悉一些相關操作,保護設施,實驗室設計等等方面對於這些高危險性物質的預防。同時也必須由在此研究領域非常有經驗的科研人員進行指導。對於實驗室的進出應當嚴格的進行控制,實驗室一定要單獨的建造或者建造在一棟大樓中於其他任何地方都分離開的獨立房間內,並且要求有詳細的關於研究的操作手冊進行參考。在這樣的實驗研究中三級的生物安全櫃是必需的。
4.如何選擇生物安全櫃如何選擇生物安全櫃
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Q:我需要購買的是生物安全櫃還是超淨工作台
A:超淨工作台提供的是對樣品的保護,對操作者和環境是不提供保護的;廣義上的生物安全櫃同時提供對操作者、環境 和樣品的保護。所以,從您需要的保護情況上,可以得出正確的選擇;
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Q:我應該購買哪種類型、防護級別的生物安全櫃
A:一般來說,除非需要做一些未知菌種和病毒和活體的研究需要使用三級生物安全櫃,二級生物安全櫃已經能基本滿足 我們的正常工作需要。對於不含有毒、放射性、揮發刺激性溶劑的樣品的實驗,A2型生物安全櫃就已經滿足使用 要求,對於醫院系統採購,因為病毒及菌種類別較複雜,而且實驗條件變化大,建議使用B2 全排型生物安全櫃;
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Q:如何評判一台生物安全櫃的好壞
A:生物安全櫃主要是用來做生物危害性防護的,所以對操作者的保護考慮是評判產品好壞的主要依據。二級生物安全櫃 最核心的技術是濾膜(包含濾膜材質、濾膜截留效率、濾膜壽命)、風路設計(包括前操作面的平衡、沉降風速以及 風速的均一性、進氣風速、風的垂直沉降形態)、報警設置(好的生物安全櫃應該包含低風速報警、前窗錯誤位置的 報警、紫外連鎖裝置、B2 全排機型還需要有外風機連鎖裝置)和負壓保護(包含側壁負壓,背部負壓、頂部負壓)。 所以通過上述指標的比較可以知道生物安全櫃的優劣;
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Q:負壓保護腔如何來避免污染和交叉污染
A:好的設計會在結束工作後風機可以進一步進行一段時間的空轉來潔淨消毒,如果沒有這個設計,操作者需要在實驗操 作結束後,將櫃體繼續開啟一定時間以最大程度排出污染物。
5.生物安全櫃櫃內操作主要注意事項生物安全櫃櫃內操作主要注意事項
- 緩慢移動原則:為了避免影響正常的風路狀態,櫃內操作時手應該盡量平緩移動。
- 物品平行擺放原則:為了避免物品和物品之間的交叉污染現象產生,在櫃內擺放的物品應該盡量呈橫向一字擺開,避免回風過程中造成交叉污染。同時避免堵塞背部回風隔柵影響正常風路。
- 避免震動原則:櫃內盡量避免震動儀器(例如離心機、旋渦振盪器等)的使用,因為震動會使得積留在濾膜上的顆粒物質抖落,導致操作室內部潔淨度降低,同時如果在前操作面風速平衡失敗還會引起安全櫃對操作者的污染。
- 不同樣品櫃內移動原則:櫃內兩種及以上物品需要移動時,一定遵循低污染性物品向高污染性物品移動原則,避免污染性高的物品在移動過程中產生對櫃體內部的大面積污染。
- 明火使用原則:櫃內盡量不要使用明火!因為在明火使用過程中產生的細小顆粒雜質將被帶入濾膜區域,這些高溫雜質會損傷濾膜。無法避免一定需要使用的時候,宜使用低火苗的本生燈。
資料提供: ESCO MICRO PTE LTD